我收到的抗體是在環(huán)境溫度下運(yùn)輸?shù)摹?/span>這會(huì)損壞抗體嗎?
在許多情況下,不需要在運(yùn)輸過程中保持貨物冷卻。這對(duì)于凍干抗體/蛋白質(zhì)總是如此,但也可能適用于以液體形式出售的蛋白質(zhì)/抗體。但是,在您收到貨物后,您應(yīng)該遵守?cái)?shù)據(jù)表中規(guī)定的存儲(chǔ)建議。
我忘記將收到的凍干抗體放入冰箱,我該怎么辦?
凍干的抗體/蛋白質(zhì)非常穩(wěn)定,只有在溶解后才會(huì)對(duì)儲(chǔ)存條件敏感。它們可以在環(huán)境溫度下未開封保存多天,但應(yīng)至少保存在 2-8 °C。未開封的凍干物(數(shù)年?。┑拈L(zhǎng)期儲(chǔ)存溫度應(yīng)至少為 -20 °C。
到達(dá)后我應(yīng)該如何儲(chǔ)存蛋白質(zhì)/抗體?
您應(yīng)該始終遵循數(shù)據(jù)表中的建議。一般來說,蛋白質(zhì)/抗體溶液應(yīng)至少儲(chǔ)存在 2-8 °C 或 -20 °C 下。
為什么我應(yīng)該將我的蛋白質(zhì)/抗體等分保存?
使用等分試樣有助于避免蛋白質(zhì)/抗體的反復(fù)凍融。它還可以幫助您避免由污染引起的問題。收到您的蛋白質(zhì)/抗體后,根據(jù)您的用途確定等分試樣的最佳大小,并相應(yīng)地分裝產(chǎn)品。您應(yīng)該小心地在無菌條件下分裝蛋白質(zhì)/抗體,并且只能使用無菌緩沖液/溶液。我們強(qiáng)烈建議僅使用未開封/新鮮高壓滅菌的溶液和緩沖液作為稀釋劑。
為什么要避免反復(fù)凍融抗體/蛋白質(zhì)?
應(yīng)避免抗體/蛋白質(zhì)溶液的反復(fù)冷凍和解凍,因?yàn)檫@可能會(huì)導(dǎo)致功能下降。這可能是由于冰晶的形成和/或由于凝集等導(dǎo)致的功能性蛋白質(zhì)的喪失造成的。
如果在 2-8 °C 下儲(chǔ)存的抗體/蛋白質(zhì)溶液在幾周內(nèi)不使用,則應(yīng)將它們分裝以便長(zhǎng)期儲(chǔ)存并在 -20 °C 或 -80 °C 下冷凍。
為什么建議將蛋白質(zhì)/抗體的等分試樣儲(chǔ)存在至少 50µl 的液體中?
根據(jù)儲(chǔ)存容器的材料,抗體/蛋白質(zhì)可能會(huì)與容器表面結(jié)合。蛋白質(zhì)/抗體的量越少,可能需要越多的材料來使容器表面飽和。綁定到表面的材料可能無法恢復(fù)。
這就是為什么您應(yīng)該使用低蛋白質(zhì)結(jié)合的微量離心管,并且等分試樣應(yīng)至少為 50 µl,以避免吸附損失。
此外,如果您在 -20 °C 或 -80 °C 下長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存少量液體,即使您使用看似氣密的容器,也可能會(huì)因蒸發(fā)或升華而損失材料。
為此,預(yù)先稀釋蛋白質(zhì)/抗體溶液(例如 PBS/5% BSA 中的 1:5 或 1:10)以用于隨后的等分會(huì)很有幫助。
如何避免解凍和重新冷凍我的抗體/蛋白質(zhì)?
另一種選擇是在-20°C 下在甘油存在下液體儲(chǔ)存抗體/蛋白質(zhì)溶液:為此,用高度純化的甘油(ACS 級(jí)或更好)作為防凍劑以 1:1 稀釋溶液。甘油的使用通過將抗體/蛋白質(zhì)溶液保持在液態(tài)來抑制破壞性冰晶的形成
重要提示:如果我添加甘油作為防凍劑,我是否必須采取特殊預(yù)防措施?
使用純度較低的甘油或被細(xì)菌污染的甘油會(huì)嚴(yán)重?fù)p害抗體偶聯(lián)物的功能,尤其是 HRPO 偶聯(lián)物。如果您不確定甘油的質(zhì)量,您應(yīng)該先用一小部分樣品評(píng)估其適用性!
請(qǐng)注意,與原始濃度相比,添加甘油會(huì)使蛋白質(zhì)和鹽(緩沖液)的量減少一半。數(shù)據(jù)表中的抗體/蛋白質(zhì)稀釋建議必須相應(yīng)地進(jìn)行調(diào)整。
當(dāng)我將其儲(chǔ)存在 -80 °C 時(shí),甘油是否也能保護(hù)我的抗體/蛋白質(zhì)?
不!甘油的使用通過將抗體/蛋白質(zhì)溶液保持在液態(tài)來抑制破壞性冰晶的形成。這種保護(hù)在 -80 °C 的溫度下不起作用。
您是否建議將抗體/蛋白質(zhì)儲(chǔ)存在“無霜冰箱"中?
不!無霜冷凍機(jī)使用重復(fù)的凍融循環(huán)來減少內(nèi)部積冰。反復(fù)凍融循環(huán)可能會(huì)損壞您的抗體/蛋白質(zhì)。
對(duì)于與熒光團(tuán)結(jié)合的抗體的儲(chǔ)存,您有什么特別的建議嗎?
與熒光團(tuán)結(jié)合的抗體應(yīng)保存在不透光的容器中,以避免功能喪失。