prozyme GKE-5002說(shuō)明書

Prozyme 公司位于美國(guó)加州，為廣大客戶提供診斷和科研所需的標(biāo)記物、蛋白質(zhì)與酶。Prozyme 于2003年1月收購(gòu)了Glyko®產(chǎn)品線，包括研究糖類的酶及相關(guān)試劑。其中也包括Glyko®于1999年收購(gòu)的Oxford GlycoSciences,Ltd 公司生化試劑產(chǎn)品線。

Glyko® Endo H [GKE-5002]

在高甘露糖和一些雜合型N-聚糖的N，N'-二乙?；鶜ざ牵℅lcNAc-GlcNAc）核心內(nèi)裂解。內(nèi)切糖苷酶H，甘露糖基糖蛋白內(nèi)切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。

來(lái)源：
來(lái)自Streptomyces plicatus ^1的重組基因，在大腸桿菌中表達(dá)。

特異性：
在N-連接聚糖的殼寡糖（GlcNAc-GlcNAc）核心的GlcNAc殘基之間切割。Oligomannose和一些雜合型N-聚糖從糖蛋白中釋放出來(lái)，留下單一的GlcNAc與天冬酰胺連接。這種特異性不同于也切割雙觸角復(fù)合型N-聚糖的Endo F2（GKE-5008）和通過內(nèi)層GlcNAc和天冬酰胺之間的切割釋放大多數(shù)N-聚糖的PNGase F（GKE-5006）。

圖1： GKE-5002 Endo H的切割特異性

R ₁：人_2-150
R ₂：H，C2和/或C4 
R _3上的單糖或寡糖：GlcNAc±Fuc，Asn或Dol-pp

應(yīng)用：從糖肽/糖蛋白中
選擇性釋放高甘露糖N- 連接的寡糖。該酶已被廣泛用于糖蛋白，多萜醇連接的聚糖和N-糖基化的生物合成途徑的表征。

船舶：

• 用于GKE-5002的WS0079 5x反應(yīng)緩沖液（500 mM檸檬酸鈉/磷酸鹽，pH 5.5）
• WS0012變性溶液（2％SDS /1MβME）
• WS0013洗滌劑溶液（15％洗滌劑溶液）

配方：
50mM磷酸鈉pH 7.5,25mM EDTA和0.05％疊氮化納

適pH：
5.5

單位定義：
一個(gè)單位定義為在37℃，pH5.5下，在1小時(shí)內(nèi)催化從60μmol變性核糖核酸酶B釋放N-連接寡糖所需的酶量。

尺寸： 30 mU（200μl）

濃度： ≥0.15U / ml

產(chǎn)品代碼： GKE-5002

1.羅賓斯PW，RB的Trimble，維爾特DF，赫林C，梅利樓梅利GF，達(dá)斯R，吉布森BW，所述的Biemann K.一級(jí)結(jié)構(gòu)鏈霉菌酶內(nèi)切-β-N-乙酰氨基葡H.  生物化學(xué)雜志。1984年6月25日; 259（12）：7577-83。

EC編號(hào)：3.2.1.96

CAS號(hào)碼：  37278-88-9